女人与公拘交的A片视频网站

            你的位置:首頁 > 新聞動態 > 行業新聞

            可裂解自組裝標簽助力中大型醫用多肽的重組生產

            2016-8-16 10:01:49   來源:   網址:www.eli28.com   點擊:

                多肽常被應用于疾病治療中,但是中大型多肽(30-100個氨基酸)的重組生產和化學合成卻依然困難重重。早在2011年,清華大學化學工程系的林章凜教授實驗室就在《Microbial Cell Factories》上發文《Active protein aggregates induced by terminally attached self-assembling peptide ELK16 in Escherichia coli》,首次報道了在大腸桿菌中,將離子自組裝多肽ELK16LELELKLK2附連到模型蛋白質的羧基端,能夠有效誘導胞漿包涵體或活性酶聚集體的形成。

                研究人員主要構建了兩個質粒:PET-P-Intein-ELK16(基于2011年研究中的PET30a-LipA-I-ELK16)和PET-Trx-P-Intein-ELK16,前者用于表達融合蛋白(PET30a-LipA-I-ELK16),后者用于表達蛋白Trx-peptide -intein-ELK16、提高不同N端蛋白的表達和增加疏水性肽的溶解度。融合蛋白表達后,經DTT誘導內含肽介導裂解,可溶性肽被直接釋放到上清液中,而不溶性肽則可以被重新折疊,并通過反向高效液相色譜法純化。此外,靶多肽N-末端上游的硫氧還蛋白標簽(Trx標簽)也可通過腸激酶切割位點被切除,得到最終的靶肽。在實驗室規模下,多肽的最終產率在0.11.8ug/mg濕細胞重。

                研究人員提到,這項研究可為化學合成或普通重組生產困難和昂貴的多肽提供一種快速和有效地生產途徑,這種方法尤其適合中大型多肽、可被降解多肽及對宿主有毒性的多肽的生產。此外,這種方法還可大大減少下游加工的成本和時間。因此可被應用于工業制造和實驗室。

            女人与公拘交的A片视频网站